シングルセルレベルでのCAR-T細胞研究を加速するマイクロ流体ドロップレット技術

マイクロ流体ドロップレット技術は、シングルセル(単一細胞)レベルでの精密な機能解析を可能にする先端的プラットフォームであり、CAR-T細胞研究における免疫動態の解明に寄与します。本技術は、微小スケールでの閉鎖系反応場を提供し、従来法では困難であった細胞間相互作用の定量化、機能的多様性の評価、ならびにハイスループットスクリーニングを実現します。

技術的応用
シングルセル(単一細胞)機能評価
CAR-T細胞と標的細胞を同一ドロップレットにカプセル化し、グランザイムB基質を用いた蛍光検出により細胞傷害性を定量化
細胞ごとのエフェクター機能分布を解析し、免疫応答の異質性を評価可能

ラベルフリー細胞傷害性解析
光学的手法により、蛍光ラベルを用いずにCAR-T細胞の増殖動態と標的細胞の生存率を追跡
動態解析に基づき、細胞増殖と細胞傷害性の相関を定量化

ハイスループットスクリーニング
数百万規模のドロップレット生成により、CAR構造の機能評価を並列的に実施
抗体スクリーニングで確立されたアルゴリズムをCARライブラリに適用可能

工程の迅速化
マイクロ流体デバイスによるT細胞活性化および遺伝子導入で、従来数日を要する工程を短縮
導入効率の向上とナイーブ様表現型保持が報告されており、臨床応用における持続性改善に寄与

品質管理(QC)
少数細胞での表現型解析や細胞傷害性評価を可能にし、GMP準拠のQCプロセスに適合
マルチパラメトリック解析により、製品の均一性と安全性を保証

比較優位性

従来法マイクロ流体ドロップレット
スループット低〜中
試薬使用量多い少量
シングルセル分解能限定的標準機能
アッセイ時間長時間短時間

ワークフロー(参考)
1. 細胞カプセル化(CAR-Tと標的細胞)
2. ドロップレット培養(制御環境下)
3. 検出(蛍光またはラベルフリー)
4. データ解析(機能分布・動態解析)
 
留意点

  • デバイス選択とドロップレット生成の最適化
  • 検出モダリティの選択(蛍光 vs ラベルフリー)
  •  
    結論
    マイクロ流体ドロップレット技術は、CAR-T細胞研究における単一細胞解析、高スループットスクリーニング、製造効率化、品質管理の各側面で有望な手法であり、次世代免疫療法の開発を加速する基盤技術となり得ます。
     
    マイクロドロップレットジェネレーター (Microfluidic Droplet Generator)μ-Droplet NTSは、送液系に無脈動マイクロ流体ポンプシステムと精密マイクロ流路チップを標準採用しており、マニュアル操作では実現の難しいハイスループットで高品質・高再現性のドロップレット生成を可能にします。
    マイクロ ドロップレットジェネレーター Microfluidic Droplet Generator ゲルマイクロドロップレット DMDGS NTサイエンス
    >>マイクロドロップレットジェネレーター (Microfluidic Droplet Generator)μ-Droplet NTSの詳細
     
    参考文献

  • Nikoniuk A, Lilova K, Thomas M, Szita N. The potential of microfluidic cell analysis in CAR T cell therapy manufacturing. Front Bioeng Biotechnol. 2025;13:1613836. doi:10.3389/fbioe.2025.1613836
  • Markelov V, Arabuli KV, Gaponenko I, et al. Scalable and ultrafast CAR‑T cell production using microfluidics. Lab Chip. 2025;25(12):3005–3015. doi:10.1039/D5LC00139K
  • Wong KU, Shi J, Li P, et al. Assessment of chimeric antigen receptor T (CAR‑T) cytotoxicity by droplet microfluidics in vitro. bioRxiv. Published online December 28, 2021. doi:10.1101/2021.12.28.474351